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結核菌素診斷

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最近審查:23.04.2024
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結核菌素-一組用於使用結核菌素檢測特定敏化到結核分枝桿菌的診斷測試-蒸壓培養濾液結核分枝桿菌。結核菌素被歸類為不完全抗原 - 半抗原,它們不能引起疾病或對其產生免疫力,但引起與延遲型過敏相關的特異性應答。同時,即使在非常大的稀釋度下,結核菌素也具有很高的特異性。只有當生物體由於自發感染或卡介苗接種而被分枝桿菌預先致敏時,才可能出現對結核菌素的特異性反應。

根據其化學成分,結核菌素是一種含有結核菌素,多醣,脂質,核酸,穩定劑和防腐劑的複合藥物。由結核菌蛋白提供的結核菌素的生物學活性以結核菌素單位(TE)測量並且根據國家標准進行標準化。反過來,國家標準應該與國際標准進行比較。在國際實踐中,使用PPD-S(結核菌素Zeybert或標準結核菌素)。

目前,該國生產以下形式的PPD-L(國內純化的結核菌素Linnikova):

  • 標準稀釋液中的過敏原結核菌純化液(標準稀釋度的純化結核菌素)是即用型結核菌素,用於大規模和個體結核菌素診斷;
  • 結核純化變應原乾燥表皮,皮下和皮內使用(結核菌素純幹) - 用於對個人和結核菌素tuberkulinoterapii僅TB機構粉末製劑(供給溶解於溶劑中)。

曼圖斯測試的目的

如果人體先前致敏結核分枝桿菌(自發感染或接種卡介苗的結果),響應於所述響應結核菌素發生特定的反應,具有基本上HRT機制。反應開始結核菌素的炎性浸潤,這是基於細胞的淋巴細胞,單核細胞,巨噬細胞,上皮和巨細胞的不同程度的施用後6-8小時後發展。觸發HRT - 效應淋巴細胞的表面上從所述受體反應抗原(PPD),導致涉及抗原銷毀過程的巨噬細胞的細胞免疫的介體的分離。一些細胞死亡,分泌蛋白水解酶,其對組織具有破壞作用。其他細胞在病灶周圍累積。在任何應用結核菌素的方法中,反應的發展時間和形態與根皮內施用的療法沒有根本的不同。GZT的反應峰值為48-72小時,其非特異性組分最小,並且特異性達到最大值。

結核病診斷分為大量和個人。

大規模結核菌素診斷的目的是對結核病進行人口調查。質量結核菌素診斷任務:

  • 識別兒童和青少年結核病患者;
  • 鑑定人員。包含在該組肺結核的風險在一個TB吹觀察後(新感染的“超高”結核菌素試驗結核分枝桿菌,以增加結核菌素試驗,用hyperergic結核菌素試驗,用結核菌素皮膚試驗,長期定位於中,高),而必要性 - 用於預防性治療;
  • 選擇兒童和青少年進行助推器重新接種;
  • 定義結核病流行病學指標(人群感染,每年感染風險)。

對於質量結核菌素診斷,僅使用帶有2TE的Mantoux。在標準稀釋度中僅使用純化的結核菌素。

為了選擇兒童和青少年進行BCG的重新接種,使用2TE的Mantoux測試。根據預防性接種日曆,在7歲(中學的零級和一級)和14歲(第八和第九級)的規定年齡組中進行。先前沒有感染復甦,對Mantoux試驗呈陰性反應的臨床健康個體。

個別結核菌素診斷用於個別檢查。個別結核菌素診斷的目標:

  • 鑑別診斷postvaccinal和傳染性過敏(HRT);
  • 肺結核等疾病的診斷和鑑別診斷;
  • 個體對結核菌素敏感性的“閾值”的定義;
  • 確定結核病活動;
  • 治療效果評估。

在進行單獨的結核菌素診斷時,使用各種結核菌素試驗與皮膚,皮內,皮下注射結核菌素。關於各種結核菌素試驗被用作在標準稀釋的純化結核菌素(結核純化的過敏原標準品稀釋)和乾燥純化的結核菌素純化(過敏原結核幹)。在標準稀釋純化的結核菌素可在抗結核機構,兒童診所,軀體和傳染病醫院使用。乾燥純化的結核菌素只允許用於抗結核病設施(結核病診所,結核病醫院和療養院)。

技術研究和成果評估

結核菌素PPD-L藥物經皮內和皮下注射入人體皮膚。施用途徑取決於結核菌素試驗的類型。

Grinchar和Karpilovsky的畢業皮膚測試

GKP是結核菌素的100%,25%,5%和1%溶液的皮膚結核菌素試驗。為100%結核菌素溶液用2安瓿乾燥純化的結核菌素PPD-A中從所獲得的製備以下的溶液結核菌素100%溶液1ml的溶劑的連續稀釋。為了從帶有無菌注射器的100%溶液的安瓿中獲得25%的溶液,收集1ml並倒入無菌乾燥小瓶中。另一個3ml溶劑通過另一個無菌注射器加入,瓶子充分搖動,製備4ml 25%結核菌素溶液。對於從用無菌1ml注射器增益的25%溶液的小瓶結核菌素的5%的溶液,並轉移到一個無菌的乾燥小瓶中,然後加入4毫升的溶劑中,攪拌,得到5的結核菌素等的5%溶液的毫升

對於前臂,用70%乙醇中的溶液中預處理的幹性皮膚的內表面,無菌移液管逐滴施加結核菌素各種濃度(100%,25%,5%,1%),以結核菌素濃度降低從尺骨在遠端方向上折疊。低於1%的結核菌素溶液滴加不含結核菌素的溶劑作為對照。對於每種結核菌素溶液和監測,使用單獨的標記的移液管。拉下面的左手前臂的皮膚上,然後ospoprivivalnym違反在裂縫形式的皮膚表面層的完整性的筆為5毫米長,通過在臂的縱向軸線的方向上每個液滴拉伸。划痕產生第一至溶劑液滴,然後依次經由1%,5%,25%和結核菌素的100%溶液,結核菌素按摩划痕對於藥物滲透入皮膚之後產生每一筆的扁平側的2-3倍。前臂打開5分鐘晾乾。對於每位受檢者使用單獨的無菌筆。在划痕現場出現一個白色的坐墊,表明有足夠的時間吸收結核菌素。之後,用無菌棉花去除結核菌素殘留物。

評估NA的HCUC。Shmelev在48小時內對HCV有以下反應:

  • 無反應 - 對所有結核菌素溶液無反應;
  • 非特異性反應 - 在施用100%結核菌素溶液(極少見)的地方輕微變紅;
  • 正常反應 - 對大濃度結核菌素中度敏感,對1%和5%結核菌素溶液反應不敏感:
  • giperergicheskaya反應 - 對所有結核菌素滲透濃度的反應隨著結核菌素濃度的增加而增加,可能的膀胱 - 壞死性改變,淋巴管炎,篩查;
  • 均衡反應 - 對於所有結核菌素濃度大致相同的滲透物濃度,大濃度的結核菌素不會引起足夠的反應;
  • 一個矛盾的反應是對較高濃度結核菌素的反應強度較小,對較小濃度結核菌素的反應更強烈。

均衡和矛盾的反應也被稱為對HCV不適當的反應。有時對HCV的不適當反應歸因於過度反應。

在澄清結核菌素過敏的性質時,GKP具有不同的診斷價值。postvaccinal HRT的特點是正常適當的反應,而在IA的情況下,對HCV的反應可能是hyperergic,均衡,或矛盾。在初次感染(“轉向”)的初期,發生功能性變化,觀察到矛盾的,平等的反應。

在幾乎健康的兒童中,有利地轉移了原發性結核感染。GKP也是正常的。

SCP對結核病和其他疾病的鑑別診斷非常重要,用於確定結核病進程的活動。在活動性肺結核患者中,過度反應,平衡反應和矛盾反應更為常見。結核病的重病過程可伴有精力充沛的反應。

降低靈敏度根據SCE結核菌素患者(從hyperergic反應過渡normergicheskie從不足以充分,從高能到正normergicheskie)與背景中抗生素治療結核病表明反應性和治療的有效性的正常化。

用各種稀釋度的結核菌素進行皮內試驗

結核菌素的初始溶液是通過將安瓿純化的結核菌素純化的PPD-L(5萬TE)與溶劑安瓿混合來製備的,結核菌素的主要稀釋度是1ml中的5萬TE。該藥應溶解1分鐘,直至澄清無色溶液。結核菌素的第一次稀釋通過向主要稀釋液(在0.1ml溶液中獲得1000TE)向安瓿中添加4ml溶劑來製備。通過向1ml第一稀釋液中加入9ml溶劑(100μl在0.1ml溶液中獲得)來製備第二次結核菌素稀釋液。所有後續稀釋的結核菌素(8日前)均以類似方式製備。因此,結核菌素的稀釋度對應於在0.1ml溶液中的下列劑量的結核菌素:第一次稀釋--1000TE,2-100TE,3-10TE,4-1TE。5 th - 0,1 TE,6 th - 0,01 TE。7日-0.001 TE。8日-0.0001 TE。

用不同稀釋度的結核菌素進行的曼圖氏試驗也是以相同的方式進行的。作為2 TE的生產。使用單獨的注射器和針進行每次稀釋。在一個前臂的兩個樣品稀釋在彼此的6-7厘米的距離結核菌素操作。同時可以放在其他前臂第三樣品與另一個稀釋結核菌素。72小時後評估樣品:

  • 陰性反應 - 沒有丘疹和充血,僅存在敲除反應(0-1毫米);
  • 可疑的反應 - 小於5毫米的丘疹或任何大小的充血;
  • 陽性反應 - 丘疹5毫米或以上。

當對結核菌素的最小稀釋度實現陽性反應時,滴定(確定結核菌素敏感性的閾值)完成。對0.1 TB結核菌素高度稀釋的陽性反應。0.01 TE等。表明身體高度敏感,通常伴有活動性結核病。絕大多數97-98%患者對100 TE的負面反應可以使您拒絕診斷結核或排除過敏的傳染性。

絕大多數患有皮膚和皮內結核菌素樣本的患者和感染者僅顯示局部對結核菌素的反應。在個別情況下,2 TE的Mantoux測試注意到常見反應。這些患者需要接受徹底的臨床和放射檢查。甚至更罕見地觀察到局灶反應。

科赫皮下結核菌素試驗

科赫的皮下結核菌素試驗是皮下注射結核菌素。

在兒童的練習中,Koch的測試通常以20 TE開始。對於這種皮下在標準0.2毫升與1ml純化的結核菌素給藥,或排除對結核菌素的敏感性的初步研究的閾值的稀釋度稀釋第三乾燥純化結核菌素。

許多作者首次劑量為20 TE的Koch試驗推薦用於2個TE的Mantoux樣品的正常特徵以及100%結核菌素在HCV中的陰性或弱陽性反應。由於對用20TE的Koch測試的負面反應,劑量增加到50TE。然後到100 TE。對於2 TE的Mantoux測試過度反應的兒童,Koch測試從引入10 TE開始。

為了回應科赫的測試,本地,一般和局部的反應發展。

  • 局部反應發生在註射結核菌素的部位。反應被認為是積極的,滲透的大小為15-20毫米。沒有共同的焦點反應,它沒有什麼信息。
  • 局灶性反應 - 在結核病灶中引入結核菌素後發生變化。伴隨臨床和X線徵象,建議在引入結核菌素之前和之後研究痰,支氣管沖洗水。陽性反應小葉(臨床症狀的增加,增加了X射線檢查灶週炎症,細菌分離的外觀)被設定為與其他疾病結核病的鑑別診斷,而在結核病過程的活性的測定。
  • 一般反應表現為身體整體惡化(體溫,細胞和生物化學血液成分)。
    • 溫度反應被認為是陽性,如果發生主體的溫度上升在0.5℃下高於最高至結核菌素的皮下注射(測溫是在3小時時適宜每天進行6次連續7天 - 在試驗前2天至5天的背景樣品)。在絕大多數患者中,在第二天觀察到體溫升高,儘管在第四至第五天可能稍後增加。
    • 皮下注射結核菌素30分鐘或1小時後,嗜酸性粒細胞的絕對數量減少(FA Mikhailov試驗)。24-48小時後,將ESR增加5毫米/小時,嗜中性粒細胞刺在6%或更高的數量,淋巴細胞的含量由20%或更多(博布羅探頭)降低10%和血小板。
    • 皮下注射結核菌素24-48小時後通過減少α白蛋白和增加的含量降低白蛋白-球蛋白比1,α - 2 -和γ球蛋白(蛋白-結核菌素試驗Rabuhina-Joffe的)。當指標變化不小於初始水平的10%時,該測試被認為是正面的。

替代方法

除了體內使用的結核菌素外,已開發了使用結核菌素或各種分枝桿菌抗原的體外製劑。

為了檢測結核分枝桿菌抗體,診斷試劑發布了紅細胞結核抗原幹細胞紅細胞,用磷脂抗原致敏。Diagnostics旨在進行間接血凝反應(RNGA)反應,以檢測針對結核分枝桿菌抗原的特異性抗體。該免疫學測試用於確定結核病過程的活性和治療的控制。為了確定患者血清中結核分枝桿菌的抗體,還設計了一種免疫 - 酶測試系統 - 用於進行ELISA的一組成分。用於實驗室確認各種定位結核病的診斷,評價治療的有效性以及決定分配特定的免疫糾正。ELISA對結核病的敏感性很低,為50-70%,特異性小於90%,限制了它的使用,並且不允許使用測試系統來篩查結核感染。

PCR-測試系統用於檢測分枝桿菌。

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對曼圖考試的禁忌症

2 TE的Mantoux測試的禁忌症:

  • 皮膚病,急性和慢性傳染病和軀體疾病(包括癲癇)在惡化期間;
  • 過敏性病症,急性和亞急性期的風濕病支氣管哮喘,在惡化期間具有嚴重皮膚表現的特質;
  • 兒童群體的兒童感染檢疫;
  • 在其他預防性疫苗接種(針對麻疹的DTP疫苗接種等)之後不到1個月。

在這些病例中,Mantoux檢測在臨床症狀消失後1個月或隔離後立即進行。

用結核菌素進行真皮和皮內試驗沒有絕對的禁忌症。在急性呼吸道感染期間,不建議在慢性過敏性疾病惡化期間設置它們,伴有剝脫性皮炎,膿皰性皮膚病。

患有活動性風濕病的患者皮下給予結核菌素是不理想的,特別是伴有心臟損傷,並伴隨著消化系統慢性疾病的惡化。

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影響Mantoux測試結果的因素

結核菌素反應的強度取決於許多因素。在兒童中,結核菌素的敏感性高於成人。嚴重形式的肺結核(腦膜炎,粟粒性肺結核,乾酪性肺炎)通常表明由於明顯抑制了機體的反應性而對結核菌素的敏感性較低。相反,某些形式的肺結核(眼睛結核,皮膚結核)往往伴有對結核菌素的高度敏感性。

對2 TE的反應強度取決於對肺結核再次接種的頻率和多樣性。隨後的每次再接種都會導致結核菌素敏感性增加。反過來,BCG再次接種的次數減少導致Mantoux試驗陽性結果數量減少2次,即超過7次。因此,撤銷再次接種有助於揭示結核分枝桿菌感染兒童和青少年的真實水平,這反過來又允許BCG在需要的時間對青少年進行再接種。

揭示了Mantoux反應的強度與BCG的postvaccinal徵兆的強度的依賴性。癒合後疤痕越多,對結核菌素的敏感性越高。

在蠕蟲侵襲中,甲狀腺功能亢進症,急性呼吸系統疾病,病毒性肝炎,慢性感染病灶,對結核菌素的敏感性增加。此外,長達6年的IA(HRT)在年長的兒童中更為明顯。

增益靈敏度針對兒童疾病(DTP,的DTaP-M TD,麻疹,腮腺炎疫苗)疫苗接種後的期間1天設定結核菌素試驗10個月時觀察到的結核菌素。此前,負面反應變得可疑和積極,1 - 2年後他們再次變為負面。因此,計劃在預防性接種兒童感染之前或不早於接種疫苗後1個月內進行結核病診斷。

夏季記錄的結核菌素反應較不明顯。結核菌素反應的強度隨著發熱條件,腫瘤疾病,病毒性童年感染,月經期間,治療糖皮質激素,抗組胺藥而降低。

在非典型分枝桿菌引起結核菌素敏感性較差的地區,評估結核菌素試驗結果可能很困難。當使用不同的抗原時,各種類型的分枝桿菌的抗原結構差異會引起不同程度的皮膚反應嚴重程度。當用不同類型的結核菌素進行分化試驗時,最明顯的反應是由結核菌素引起的,該結核菌素是由該生物體感染的分枝桿菌類型製備的。這類藥物通常被稱為敏化素。

對結核菌素的負面反應稱為結核菌素無反應性。可能的主要能量 - 未受感染個體對結核菌素的反應不足,以及在受感染個體中發展的二次能量。次級無反應性,反過來,可以是正的(如生物處理的從結核感染或病症immunoanergii變體觀察到,例如,在“潛伏mikrobizma”的情況下)和負(與結核病的嚴重形式)。次級無反應性也會發生時衣原體結節病,許多急性傳染病(麻疹,風疹,單核細胞增多,百日咳,猩紅熱,斑疹傷寒等),對於腳氣病,惡病質,腫瘤。

結核菌素診斷結果後,對結核菌素過敏敏感的兒童和青少年是最危險的結核病組群,需要從一名體檢醫生那裡進行最徹底的檢查。過敏性結核菌素敏感性的出現通常與局部形式的結核病的發展有關。結核菌素高血壓,結核病的風險比正常反應高8-10倍。應特別注意感染結核分枝桿菌的兒童,在存在過敏反應並與肺結核患者接觸的情況下。

在每個病例中,都有必要研究影響結核菌素敏感性的所有因素,這對於診斷,選擇正確的醫療策略,患者管理方法及其治療方法具有重要意義。

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