泌尿外科免疫學研究

將免疫圖分配給泌尿科患者意味著主治醫師假設免疫系統中存在干擾。複製的細菌，病毒，真菌感染，過敏反應，全身性疾病可以是這些疾病，其特徵在於許多綜合徵（感染，癌症，過敏，自身免疫性疾病，淋巴組織增生）的症狀。一名患者可能有多種綜合徵。例如，慢性感染性疾病（感染性綜合徵）可引起免疫缺陷和免疫缺陷可表現易感性感染性疾病和癌症（腫瘤綜合徵）。對於感染的易感性可以在繼發性免疫缺陷的背景下發生，所述繼發性免疫缺陷由於淋巴組織增生性疾病例如白血病而發展。免疫系統中有三種主要的病理變化：

• 導致免疫缺陷狀態發展的一種或另一種免疫力的定量或功能不足;
• 在免疫系統識別抗原方面的違反，導致自身免疫過程的發展;
• 過敏反應或“變態”免疫反應，表現為過敏性疾病的發展。

有篩查（1級測試）和免疫診斷的資格（2級測試）方法。前者的存在是為了糾正免疫系統中的侵害 - 後者 - 為進一步免疫修復的目的而建立涉及其實施的機制。

B-免疫細胞鏈

篩選方法

• 通過免疫熒光的B淋巴細胞的相對和絕對數量的測定或流式細胞術使用單克隆抗體與B細胞抗原（CD19，CD20，CD其中 - 分化的簇）。成人的B淋巴細胞含量正常：白細胞總數的8-19％或190-380個細胞/μl。急性和慢性細菌和真菌感染，慢性肝病，系統性結締組織疾病，慢性淋巴細胞性白血病，骨髓瘤發生B淋巴細胞水平增加。
• 通過單徑向免疫擴散，或比濁法turbometrii，放射免疫測定或酶免疫測定（EIA）的免疫球蛋白nespespetsificheskih（F，M，G，E）的濃度的測定。成人規範：免疫球蛋白（Ig）A 0.9-4.5 g / l。IgM 03-3.7克/升。IgG 8.0-17g / l。在發生B淋巴細胞含量增加的相同病理條件下，發生免疫球蛋白濃度的增加。降低免疫球蛋白的濃度是在先天性低丙球蛋白血症，免疫系統的腫瘤，取出脾臟，蛋白質損失，在腎或腸，治療細胞抑製劑和immunodepreesantami的疾病。

指定方法

• 通過聚矽烷二醇中的選擇性沉澱測定血液中的循環免疫複合物，然後進行分光光度密度測試（正常80-20UE）。循環免疫複合物的增加是急性細菌，真菌，病毒感染，自身免疫，免疫複合物疾病，血清病，3型過敏反應的特徵;
• 在血液細菌和病毒抗原，脫氧核糖核酸（DNA）的自身免疫性疾病，由放射免疫或ELISA鑑定精子（自身免疫性不孕不育）和protivopochechnyh抗體（腎盂腎炎和腎小球腎炎）的特異性免疫球蛋白的關係的測定。
• 精液中抗精子抗體的測定[MAR-test（混合抗球蛋白反應）]，常模為陰性。
• 為了鑑別診斷腎盂腎炎和腎小球腎炎（蛋白尿的選擇性），測定尿中免疫球蛋白的濃度。
• 通過放射免疫擴散或ELISA測定前列腺汁液中的IgE以診斷過敏性前列腺炎。 
• 研究在B細胞有絲分裂原淋巴細胞B的響應blasttransformation反應（商陸分裂為在T淋巴細胞的存在B淋巴細胞的blasttransformation反應的刺激），其中的95％-100％的標準值。

免疫的T細胞聯繫

篩選方法

• 通過免疫熒光的相對和絕對數目成熟CD3 T淋巴細胞反應的測定或流動cytofluorometry使用抗SDZ單克隆抗體。成人的標準是58-76％或1100-1700個細胞/μl。減少T淋巴細胞失敗指示符細胞免疫的數目。這是幾個仲和原發性免疫特性（慢性細菌和病毒感染：結核病，獲得性免疫缺陷綜合症，癌症，慢性腎功能衰竭，創傷，應激，衰老，營養不良，治療的細胞毒性藥物，電離輻射）。增加的T淋巴細胞的數量是針對免疫機能亢進或淋巴組織增生疾病的背景。隨著炎症，T淋巴細胞的數量首先增加，然後減少。T淋巴細胞不減少表明炎症過程的慢性化。
• 評估淋巴細胞亞群。
  • 確定T輔助細胞（抗CD4抗體）的數量。通常，36-55％或400-1100個細胞/μl。增加這些細胞的數目發生在自身免疫性疾病，瓦爾登斯特倫氏病，免疫激活antitransplantatsionnogo; 減少T-輔助細胞的數量發生於慢性細菌，病毒，原蟲感染，結核病，獲得性免疫缺陷綜合症，惡性腫瘤，燒傷，創傷，營養不良，老化，細胞抑製劑治療，電離輻射。
  • 確定T-抑製劑的數量（抗CD4抗體）。通常，17-37％或300-700個細胞/μl。當T輔助者的數量增加時，T輔助者的數量增加以及T輔助者的數量減少的相同條件下發生，並且在相同的條件下增加。
  • 免疫調節指數CD4 / CD8，在標準1,5-2,5。超過2.5的過度活躍（過敏性和自身免疫性疾病）; 活動減少 - 小於1.0（傾向於慢性感染）。在炎症過程開始時，免疫調節指數升高，當它消退時，它恢復正常。

指定方法

• 確定自然殺傷細胞（NK細胞）的數量 - 抗CD16和抗CD56抗體。CD16淋巴細胞的常模是6-26％，CD56-9-19％。增加NK細胞的數目發生在移植物排斥，降低 - 在病毒感染，癌症，原發性和繼發性免疫缺陷，燒傷，創傷和應力，與細胞抑製劑治療和電離輻射。 
• 用白細胞介素-2受體（活化標記） - 抗CD25抗體測定T淋巴細胞的數量。規範是10-15％。在過敏性疾病，移植排斥反應，初次感染急性期對胸腺依賴性抗原的應答，NK細胞數量減少的相同疾病的減少中觀察到它們的數量增加。
• 檢查活化標誌物的表達 - II類HLA-DR的組織相容性分子。炎症過程中，丙型肝炎，乳糜瀉，梅毒，急性呼吸道感染患者中表達增加。
• 淋巴細胞凋亡的評估。淋巴細胞凋亡的準備的指示可以通過其在線粒體和BD-2原癌基因表面的Fas受體（CD95）的表達來鑑定。碘化丙啶，其結合到DNA片段和膜聯蛋白Y，在細胞膜中出現的早期細胞凋亡的結合磷脂酰絲氨酸：細胞凋亡是由淋巴細胞處理兩種熒光染料進行評價。結果的評估在流式細胞熒光儀上進行。結果的計算基於用各種染料染色的細胞的比例。未染色的細胞是活細胞，只能用膜聯蛋白在Y相關， - 細胞凋亡的早期跡象，用碘化丙啶和膜聯蛋白I - 細胞凋亡的後期表現，僅染色碘化表明壞死。
• 體外T淋巴細胞增殖的評估。
  • 細胞胚泡形成的變化是淋巴細胞爆炸轉化的反應。白細胞與植物來源的任何促細胞分裂素（凝集素）一起溫育。更常用的植物血凝素72小時，然後做塗片，染色併計數爆炸的數量！刺激指數是實驗中轉化細胞的百分比（植物凝集素的培養物）與對照（不含植物凝集素的培養物）的轉化細胞的百分比的比率。可以通過在培養細胞中包含放射性標記物（ZN-thymdin）評估淋巴細胞的原始轉化反應，因為當分裂細胞時DNA合成增加。增殖反應紊亂發生在與感染相關的原發性和繼發性免疫缺陷，腫瘤疾病，腎功能不全和手術干預中。
  • 這些研究的評價，活化標記（CD25，轉鐵蛋白受體對 - CD71）的表達分子和MHC II類HLA-DR，它們是靜息T淋巴細胞基本上不存在。T淋巴細胞與植物血凝素刺激後3天，表達活化標誌物通過直接或間接免疫熒光分析，流式細胞術使用分泌受體的單克隆抗體。
  • 測量介質的由活化的T淋巴細胞[白介素（IL）2，IL-4，IL-5，IL-6，γ-干擾素，等]，用放射免疫法或ELISA中合成的量。尤其重要的是評估活化培養物上清液和細胞內的γ-干擾素和IL-4作為TH和Th2標記物的濃度。如果可能的話，它是有用的，以確定通過的信使核糖核酸的蘇氨酸生產用於相應的細胞因子和細胞受體的表達強度水平相關的細胞因子的基因的表達。
    
• 抑制淋巴細胞遷移的反應。與抗原釋放淋巴因子反應的致敏T淋巴細胞，包括因子。抑制淋巴細胞的遷移。當將有絲分裂原引入細胞培養物時觀察到抑制現象。抑製程度的評估使得有可能判斷淋巴細胞釋放細胞因子的能力。通常，遷移頻率取決於具體的促分裂原，為20-80％。
• 評估NK細胞的細胞毒性。確定自然殺傷細胞殺死紅細胞系K-562的靶細胞的能力。如果評估抗體依賴性細胞毒性，則使用用IgG抗體包被的靶細胞。用3H-尿苷標記靶細胞並與效應細胞一起溫育。靶細胞的死亡是從放射性標記釋放到溶液中估計的。惡性腫瘤發生細胞毒性降低。在某些情況下，當需要用白細胞介素治療的有效性的預後時，與某些細胞因子一起溫育時評估NK細胞的細胞毒性。

吞噬細胞功能的研究

篩選方法

研究吞噬細胞對微生物細胞的吸收（乳膠顆粒的吞噬作用，葡萄球菌，大腸桿菌或從患者中分離出的微生物的測試培養物）。通過離心肝素化血液，分離白細胞懸浮液，加入IV血型血清以調理（調理素是增強吞噬作用的蛋白質）。將微生物懸浮液稀釋，與白細胞混合併孵育120分鐘，在孵育開始後30.90.120分鐘後取樣分析。所選擇的白細胞懸液製成塗片。確定以下吞噬作用指標：

• 吞噬指數 - 在孵育30分鐘和120分鐘時進入吞噬作用的細胞的百分比; 吞噬指數的規範值（30）吞噬指數的94％（120） - 92％;
• 吞噬數 - 細胞內平均細菌數量; 吞噬數（30）11％，吞噬數（120） - 9.8％的規範值;  
• 吞噬數目係數 - 吞噬數目（30）與吞噬數目（120）之比; 正常1.16;
• 嗜中性粒細胞的殺菌指數是吞噬細胞內殺死的微生物數量與所攝取的微生物總數的比率; 在66％的規範。

指定方法

• NST試驗中對吞噬細胞的殺菌活性的調查是NST試驗。向白細胞中加入四氮唑藍染料。當染料被嗜中性粒細胞吸收時，還原過程在氧自由基的作用下發生，導致藍色染色。反應在96孔平底板中進行。在HCT和白細胞混合物的前三個孔中，在後者中加入Hanks溶液（自發HCT） - 乳膠顆粒; 在37℃孵育25分鐘。在閱讀器上以540nm讀取結果並以常規單位表示。計算刺激因子（K _st），等於受刺激孔中光密度與無刺激孔平均光密度的比值。在健康人中，_{HCT spont} = 90± _45UE，NST _Stim = 140± _60UE。K _st = 1.78±0.36。
• 粘附分子的研究。在流式細胞熒光測定的幫助下，測定表面抗原CD11a / CD18，CD11b / CD18，CD11c / CD18的表達。違反粘連的免疫缺陷表現為複發感染，傷口癒合緩慢和感染灶中無膿液。

對補體系統的調查

篩選方法

補體溶血活性的測定 - 經典補體激活途徑的研究。將不同稀釋度的患者血清和健康人的血清加入塗有抗體的綿羊的紅細胞中。以溶血活性單位作為血清稀釋度的倒數，其中50％的紅細胞被破壞。通過溶液中血紅蛋白的產量通過光度計評估溶血程度。在腎受累的系統性紅斑狼瘡，急性腎小球腎炎中觀察到補體的溶血活性降低。合併免疫缺陷，重症肌無力，病毒性肝炎，淋巴瘤，增加 - 阻塞性黃疸，橋本甲狀腺炎。風濕，類風濕性關節炎，結節性動脈炎。皮肌炎，心肌梗塞，潰瘍性結腸炎，賴特綜合徵，痛風。

指定方法

• 補體成分的測定。定量測定採用放射免疫擴散法和散射比濁法進行。
  該研究沒有提供信息，除非補體成分的抗原特性改變。
• 發現補體的C1q組分增強吞噬作用並介導細胞的細胞毒性。其降低發生在免疫複合物，全身性紅斑狼瘡，化膿性感染和腫瘤的疾病中。
• C3組分參與經典和替代補體途徑的激活。其濃度降低與慢性細菌和真菌感染，循環或組織免疫複合物的存在有關。
• C4組分參與經典途徑的激活。其濃度的降低與免疫複合物對補體長期激活以及控制經典補體途徑激活的C1抑製劑濃度的降低有關。在系統性紅斑狼瘡中發生C4缺陷，伴隨腎臟疾病，移植排斥，急性炎症和胃腸道疾病發生C4增加。
• C5a是C5分子的一個小片段，由於補體系統的激活而從C5分子中分離出來。其濃度增加伴隨著炎症，敗血症，過敏性疾病和過敏性疾病。
• Cl-抑製劑是一種多功能因子。它控制補體C1組分的激活，抑制激肽釋放酶，纖溶酶和激活的因子Hageman，蛋白酶Cls和Or的活性。C1抑製劑的缺乏導致血管性水腫。
• 補充研究。對於缺乏任何補體成分的標準血清，加入測試血清並測定補體的溶血活性。如果溶血活性沒有恢復到正常，則認為測試血清中該補體成分的活性降低。

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