細胞移植的局限性，危險和並發症

塑料再生醫學的基礎上，實現在診所和toti-性質多能胚胎幹細胞和祖細胞，允許體外和體內以產生預定細胞系重新填充受損組織和人類患者的器官。

使用胚胎幹細胞和人類的確定組織（所謂的成體幹細胞）用於治療目的的真正可能性不再存在疑問。然而，美國國家醫學研究院（美國）的專家建議，更詳細地研究實驗中乾細胞的特性在適當的生物模型上，客觀地評估移植的所有後果，然後才在臨床中使用乾細胞。

已經確定乾細胞是所有三種胚胎小葉的組織衍生物的一部分。幹細胞在視網膜，角膜，皮膚，表皮，骨髓和外周血中發現，在血管，牙齒的牙髓，腎，消化道，胰腺和肝臟的上皮細胞。在現代方法的幫助下，證明了乾細胞定位於成人大腦和脊髓。這些聳人聽聞的發現吸引了科學家和媒體的特別關注，大腦中的神經元無法恢復靜止細胞群的典型例子。由於個體發育的早期和晚期階段，以神經幹細胞在人類和動物的大腦產生神經元，星形膠質細胞和少突膠質細胞（幹細胞：科學進展和未來的研究方向納特衛生研究所美國，..）。

然而，在正常情況下，確定組織的干細胞的可塑性不會出現。為了實現確定性組織的干細胞的塑性潛能，必須分離它們，然後在含有細胞因子（LIF，EGF，FGF）的培養基中培養。此外，幹細胞衍生物只有在移植到免疫系統受抑制的動物（γ-照射，細胞抑製劑，白消安等）的體內才能成功存活。迄今為止，還沒有令人信服的證據表明未經照射或暴露於深度免疫抑制的動物中的干細胞可塑性。

在注射部位形成畸胎瘤皮下注射ESK免疫缺陷小鼠中 - 在這種情況下，危險的效力的PGC作用主要表現在其異位移植區。此外，在染色體異常的人類胚胎發育的頻率比在動物胚胎。在胚泡期只有20-25％的人類胚胎的由細胞與正常核型，並且在絕大多數體外受精後獲得早期人類胚胎，染色體嵌合檢測混亂和非常頻繁數目和結構畸變。

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幹細胞的有益作用

臨床試驗的初步結果證實了乾細胞對患者的有益作用，但迄今為止還沒有關於細胞移植的長期後果的信息。在文獻中，最初通過的帕金森氏病的胚胎骨髓片段的移植的陽性結果的報告為主，但隨後開始出現在數據否認移植到患者腦內胚胎或胎兒神經組織的有效的治療效果。

在二十世紀中葉造血恢復在致死劑量照射的動物被首次發現骨髓細胞的靜脈輸液後，並於1969年美國學者D.托馬斯進行第一次骨髓移植的人。缺乏免疫不相容的骨髓捐獻者的機制的知識和收件人而造成的死亡率高，由於頻繁neprizhivleniya移植和開發反應“移植物抗宿主”的。主要組織相容性複合體，它是由人類白細胞抗原（HBA），並輸入可以顯著提高骨髓移植後的成活率，從而導致了腫瘤內科治療的廣泛這種方法的方法改進的發現。十年後，造血幹細胞（HSC）的第一個移植已經執行，通過白細胞分離法從外周血獲得。於1988年在法國用於治療與範可尼貧血兒童作為造血幹細胞的來源它第一次使用臍帶血，和2000的在按下結束開始出現有關的HSC分化成潛在地擴展它們的臨床應用的範圍各種組織類型的細胞的能力。然而，出現了該材料用於移植，與GSK沿著含有相當多的在性質和雜質非造血細胞的性質不同。與此相關，正在開發純化移植物的方法和評估其細胞純度的標準。具體而言，使用CD34 +細胞的陽性免疫接種，這使得可以在單克隆抗體的幫助下分離HSC。

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幹細胞療法的並發症

骨髓移植的並發症通常是血液學的，並且與長期的醫源性全血細胞減少症有關。最常見的感染是貧血，貧血和出血。在這方面，選擇最佳的取樣方式，加工和儲存骨髓以最大限度地保存幹細胞是非常重要的，這將確保造血的快速和穩定恢復。當表徵移植物時，目前接受評估以下參數：單核細胞和/或有核細胞的數量，集落形成單位和SB34陽性細胞的含量。不幸的是，這些指標僅提供了乾細胞移植人群真實造血能力的間接評估。對於今天，即使在自體骨髓移植患者中，確定移植物長期恢復造血功能的充分性絕對準確。由於缺乏嚴格的加工標準，冷凍保存和移植測試，共同標準的製定非常困難。此外，有必要考慮影響每個特定患者中造血功能成功恢復的參數的各種因素。在自體骨髓移植最重要的是現有方案的數量，特別是預處理方案，一個週期的疾病，其在骨髓中收集方案應用集落刺激在移植後的週期因子產生的。此外，不應該忘記，胚胎移植之前的化療對骨髓幹細胞有負面影響。

異基因骨髓移植後嚴重中毒並發症的發生率顯著增加。就此而言，關於異基因骨髓移植在地中海貧血中的統計數據是有意義的。在歐洲骨髓移植組報告中，大型地中海貧血患者約記錄了800次骨髓移植。同種異體移植地中海貧血從HLA-相同的兄弟姐妹，其與嚴重的並發症和在幹細胞材料的相關部分相容或匹配的無關供體移植較高的死亡率進行大多數情況下。為了盡量減少致死性並發症的風險，患者被放置在層流無菌隔離箱，低或非細菌性前列腺炎的飲食。為了細菌的口腔去污，可以使用非吸收形式的抗生素，抗真菌藥物。為了防止固定阿米卡星和頭孢他啶全身感染，其中指定移植前一天的靜脈兩性黴素B預防，同時繼續治療，患者出院。照射前的所有血液製劑以30Gy的劑量照射。移植過程中的腸外營養是一項先決條件，通過自然限制食物攝入立即開始。

許多並發症與免疫抑製藥物的高毒性有關，這些藥物經常引起噁心，嘔吐和粘膜炎，腎損傷和間質性肺炎。化療最嚴重的並發症之一是肝靜脈閉塞性疾病，導致移植後早期死亡。在對肝臟的門脈系統的靜脈血栓形成的危險因素，應注意患者的年齡，肝炎和肝纖維化，骨髓移植後拿著免疫抑制治療的存在。靜脈閉塞性疾病在地中海貧血中尤其危險，伴有肝含鐵血黃素沉著症，肝炎和纖維化 - 頻繁輸注治療的衛星。肝臟的門靜脈系統的靜脈血栓形成的移植後1-2週內發展並且其特徵在於在上腹部快速增加血液膽紅素和轉氨酶，漸進肝腫大，腹水，腦病，和疼痛。在內皮損傷，內皮下出血，病變tsentrolobulyarnyh肝細胞，血栓性阻塞肝小靜脈和中央靜脈組織學定義的屍檢材料。在地中海貧血患者中，描述了與細胞抑製劑的毒性作用相關的致命性心臟驟停病例。

在準備移植時，環磷酰胺和白消安通常引起具有尿道上皮細胞病理變化的毒性出血性膀胱炎。環孢素A在骨髓移植中的應用常伴有腎毒性和神經毒性，高血壓綜合徵，體內液體瀦留和肝細胞的細胞溶解。婦女更常觀察到性和生殖功能受到侵犯。在移植後的青少年中，青春期發育通常不會受到影響，但在年長的兒童中，生殖器發育的病理可能非常嚴重 - 直至不育。與移植本身直接相關的並發症包括異基因骨髓細胞的排斥反應，ABO系統的不相容性，急性和慢性形式的“移植物抗宿主”反應。

進入移植ABO血型不合的骨髓idioagglutinin型“對捐贈者ABO主機”移植後的330-605天生產，從而導致長時間溶血，並在需要輸血大增後病人。所述並發症通過紅細胞群體的輸血防止只有0移植後在許多患者自身免疫性中性粒細胞減少，血小板減少症，全血細胞減少，或，為此必須進行脾切除的修正。

在急性反應的接收者的35-40％“移植物抗宿主”在100天內同種異體血紅蛋白的相同骨髓移植後發展。皮膚損害，肝臟和腸道的程度從皮疹，高膽紅素血症，腹瀉和輕度的皮膚脫屑，腸梗阻，急性肝功能衰竭而變化。地中海貧血患者頻率急性反應“移植物抗宿主”骨髓移植後我程度是75％，II和更高的程度 - 11-53％。慢性反應“移植物抗宿主”作為全身性多器官綜合徵通常在患者中，30-50％的同種異體骨髓移植後的天100-500開發。皮膚，口腔，肝臟，眼睛，食道和上呼吸道受到影響。區分慢性反應“移植物抗宿主”的有限形式時受影響的皮膚和/或肝，和普遍的，廣義皮損當與慢性活動性肝炎，眼病，唾液腺或任何其它器官組合。死因通常是嚴重免疫缺陷導致的感染性並發症。在反應“移植物抗宿主”的地中海貧血慢性輕度形式在12％的發現，中等 - 3％和嚴重 - 具有HLA-兼容同種異體骨髓的接受者的0.9％。骨髓移植的嚴重並發症是手術後50-130天發生移植排斥反應。拒絕頻率取決於調節模式。特別是，地中海貧血患者單獨甲氨蝶呤的製備過程中處理過的，排斥骨髓移植的病例中26％，觀察到，與環孢菌素A甲氨蝶呤的組合 - 9％，只有環孢菌素分配時 - 箱子8％（Haziyev等。，1995）。

骨髓移植後的傳染性並發症會導致病毒，細菌和真菌感染。其發展與深中性粒細胞減少，這是化療調節期間，細胞抑製劑打敗粘膜屏障和反應“移植物抗宿主”誘導相連。根據發展的時間，感染並發症的三個階段是區分的。在第一階段（在第一個月後移植發展）是由粘膜屏障和中性粒細胞損傷為主，常伴有病毒感染（皰疹病毒，EB病毒，巨細胞病毒，水痘帶狀皰疹），以及引起的感染grampolozhi - 炎症和革蘭氏陰性菌，念珠菌的真菌，曲霉菌。在早期移植後時期（移植的第二和第三個月後）是最嚴重的巨細胞病毒感染，這往往會導致患者死亡感染的第二階段。在地中海貧血症中，1.7-4.4％的受者發生骨髓移植後的鉅細胞病毒感染。第三階段後期移植後觀察期（操作三個月後），並且其特徵在於重症聯合免疫缺陷。這一時期是常見的引起水痘帶狀皰疹，鏈球菌，肺卡里尼，腦膜炎奈瑟菌，流感嗜血桿菌和嗜肝病毒感染。在骨髓移植後的病人的死亡率地中海貧血與細菌和真菌敗血症，特發性間質性和巨細胞病毒肺炎，急性呼吸窘迫綜合徵，急性心力衰竭，心臟壓塞，腦出血，venookklyuzionnoy肝病和急性反應“移植物抗宿主”相關聯。

目前，在開發從骨髓中分離純種干細胞造血細胞的方法方面取得了一些進展。從臍帶獲得胎兒血液的技術已經得到改進，並且已經開發了用於從臍帶血中分離血液形成細胞的方法。在科學報刊上有報導說，當在含有細胞因子的培養基中培養時，造血幹細胞能夠增殖。當使用專門設計的生物反應器擴增HSC時，從骨髓，外周血或臍帶血中分離的干細胞造血細胞的生物量顯著增加。HSC擴增的可能性是細胞移植臨床開發中的一個重要步驟。

然而，在HSC體外繁殖之前，有必要分離出均質的造血幹細胞群。這通常是用標記物來實現，從而允許以選擇性標記共價連接至磁性標記或熒光標記HSC的單克隆抗體，並用合適的細胞分選儀選擇它們。同時，造血幹細胞表型特徵問題尚未得到最終解決。A. Petrenko的。，V. Hryschenko（2003）作為用於GSK候選處理的細胞，其存在CD34，AC133和THYL抗原和無CD38，HLA-DR和分化的其它標誌物（細胞用的表型CD34 + Liir）的表面上。通過線性分化標誌物（譜系，林）包括血型糖蛋白A（GPA），CD3，CD4，CD8，CD10，CD14，CD16，CD19，CD20（Muench的，2001）。移植的觀點是具有表型CD34 +CD45RalüWCD71low以及CD34 + Thy1 + CD38low / c-kit / low的細胞。

足以進行有效移植的HSC數量的問題仍然是一個問題。目前，幹血形成細胞的來源是骨髓，外周血和臍帶血以及胚胎肝臟。通過在內皮細胞和造血生長因子存在下培養牠們來實現幹細胞造血細胞的擴增。在各種方案中，使用骨髓蛋白，SCF，促紅細胞生成素，胰島素樣生長因子，皮質類固醇和雌激素誘導HSC增殖。當在體外使用細胞因子組合時，HSC庫的顯著增加可以在培養第二週結束時達到其釋放峰值。

傳統上，HSC臍帶血主要用於造血細胞。然而，成功移植臍帶血細胞所需的造血細胞的最小劑量是每1kg受體體重3.7×10 ^7個有核細胞。使用較少量的HSC顯著增加了移植失敗和疾病復發的風險。因此，臍帶血造血細胞的移植主要用於治療兒童成血細胞增多症。

不幸的是，仍然沒有採購標準以及臍血造血細胞臨床使用的標準化方案。因此，臍帶血幹細胞本身不是法律上公認的用於移植的造血細胞來源。此外，沒有關於可用海外臍krovb的銀行的活動和組織沒有道德或法律規則。同時，為了安全移植，所有的臍帶血樣本都要仔細監測。在從孕婦身上採集血樣之前，必須徵得她的同意。每個孕婦必須對HBsAg的車廂進行檢查，抗體，丙型肝炎病毒，艾滋病病毒和梅毒。每個臍帶血樣本應該定期檢測有核細胞的數量，CD34 +和集落形成能力。此外，糖化血紅蛋白進行打字，血型ABO及其Rh因子的成員資格。測試過程需要在無菌細菌學，血清學試驗作物HIV-1和HIV-2感染，乙肝表面抗原，丙型肝炎病毒，巨細胞病毒感染，NTLY NTLY-1和II，梅毒，弓形蟲病。另外，進行聚合酶鍊式反應來檢測鉅細胞病毒和HIV感染。似乎是適當的補充的協議測試臍帶血造血幹細胞的分析來識別這樣的遺傳性疾病如地中海貧血和鐮狀細胞性貧血，腺苷脫氨酶缺乏症，丙種球蛋白血症布魯頓，疾病Harlera和下注者。

在準備移植的下一階段，GSK的保存問題出現了。製備細胞時細胞活力最危險的是凍融程序。當凍結造血細胞時，其中很大一部分可能因晶體形成而被破壞。為了減少細胞死亡的百分比，使用特殊物質 - 冷凍保護劑。通常，作為冷凍保護劑，使用DMSO的最終濃度為10％。但是，對於DMSO，該濃度的特徵在於直接的細胞毒性效應，即使在最小暴露條件下也表現出來。減少期間保持剛性零溫度曝光方式和法規遵從處理材料和解凍（應用多個洗滌程序所有操作的速度）後獲得的細胞毒性作用。不要使用低於5％的DMSO濃度，因為在這種情況下，造血細胞的質量死亡發生在冷凍期間。

在混懸液混合物GSK中存在紅細胞雜質會產生髮展紅細胞抗原不相容反應的危險。同時，隨著紅細胞的去除，造血細胞的損失顯著增加。與此相關的是，提出了GSK的未分離分離程序。在這種情況下，為了保護從使用10％DMSO溶液，並以恆定的速度冷卻（HS /分鐘）到-80℃，然後將細胞懸浮液在液氮中冷凍低溫下的破壞性影響的有核細胞。據信用這種冷凍保存技術發生紅細胞的部分裂解，因此血液樣品不需要分餾。在移植前，將細胞懸液解凍，在人血清白蛋白或血清溶液中洗去血紅蛋白和DMSO。使用這種方法造血祖的保存確實比臍帶血分餾後較高，但由於存儲紅細胞ABO血型不合輸血並發症輸血的危險。

建立HSC檢測和HSC樣本庫存系統可以解決上述問題。但是，為此，有必要製定道德和法律規範，這些規範目前仍在討論中。在建立銀行網絡之前，有必要就採樣，分餾，檢測和打字程序以及GCW的低溫保存程序的標準化通過一些規定和文件。銀行GSK的有效活性的先決條件是計算機數據庫，用於與供體骨髓的關係，組織註冊世界協會（WMDA）和美國項目（NMDP）全國捐贈者的骨髓。

此外，有必要優化和規範體外擴增HSC的方法，主要是造血臍帶血細胞。HSC臍帶血的繁殖對於增加與HLA系統兼容的潛在接受者的數量是必要的。由於臍帶血量較少，其中含有的HSC量通常不能為成年患者提供骨髓再生。同時，為了進行不相關的移植，有必要獲得足夠數量的典型葛蘭素史克樣品（每1名接受者10,000至1,500,000）。

造血幹細胞移植不能消除伴隨骨髓移植的並發症。分析表明，在移植臍帶血幹細胞時，嚴重形式的急性“移植物抗宿主”反應發展為23％，慢性25％的受者發生。在26％的病例中，在HSC臍帶血移植後的第一年內，在血液病患者中觀察到急性白血病的複發。

近年來，外周造血幹細胞的移植方法不斷發展。外周血中的HSC含量很少（每100,000個血細胞有1個GSK），沒有特殊準備的情況下分離是沒有意義的。因此，供體先前被給予藥物刺激造血骨髓細胞向血液中釋放的過程。為此，使用諸如環磷酰胺和粒細胞集落刺激因子這樣的無害藥物。但即使在外周血動員HSC後，其中CD34 +細胞的含量也不超過1.6％。

為了在臨床中調動HSC，C-CEC更常用，其特徵在於相對良好的耐受性，除了骨骼中幾乎經常出現疼痛外。應該指出的是，使用現代血液分離器使我們能夠有效地分離造血幹祖細胞。然而，在正常造血條件下，必須進行至少6次手術以獲得足夠數量的造血幹細胞，這與骨髓漿的再增殖能力相當。通過每個這樣的程序，分離器處理10-12升血液，其可引起血小板減少和白細胞減少。分離程序涉及向供體施用抗凝血劑（檸檬酸鈉），但不排除在體外離心期間接觸血小板活化。這些因素為感染性和出血性並發症的發展創造了條件。該方法的另一個缺點在於動員反應的顯著變異性，其需要監測外周獻血者中HSC的含量，這是確定其最大水平所必需的。

HSC的自體移植與異體移植相反，完全排除了排斥反應的發展。然而，造血幹細胞的自體移植的顯著缺點，限制了其行為指示的範圍內，是具有移植的概率高回輸細胞白血病克隆。此外，缺乏免疫介導的“移植物抗腫瘤”作用顯著增加了惡性血液病復發的頻率。因此，自由基清除克隆造血系統腫瘤的的唯一途徑和還原在骨髓增生異常綜合徵正常多克隆造血是同種異體HSC移植強化化療。

但即使在這種情況下，大多數成血紅細胞瘤的治療僅僅是為了增加患者的存活時間並改善他們的生活質量。根據幾項大型研究，在40％的血液病患者中實現了HSC同種異體移植後延長的無病生存期。當使用HbA兼容的同胞幹細胞時，在疾病史較短的年輕患者，胚細胞數量高達10％以及有利的細胞遺傳學中觀察到最佳結果。不幸的是，與骨髓增生異常疾病患者HSC同種異體移植手術相關的死亡率仍然很高（大多數報導約40％）。國家骨髓捐獻者計劃（510名患者，中位年齡38歲）的10年工作結果表明，兩年無病生存率為29％，復發率較低（14％）。然而，由無關供體GSC同種異體移植手術引起的死亡率非常高，在兩年內達到54％。歐洲研究獲得了類似的結果（118例患者，中位年齡24歲，2年無復發生存率28％，復發率35％，死亡率58％）。

當進行強化療程化療以及隨後由異體造血細胞恢復造血功能時，常常會出現免疫血液學和輸血並發症。在許多方面，它們與人類血型不依賴MHC分子遺傳有關。因此，即使供體和受體與主要HLA抗原相容，它們的紅細胞可能具有不同的表型。分配“大”不兼容時，預先存在於受體抗體對供者紅細胞抗原，和“小”時，捐助抗體受體的紅細胞抗原。有一些“大”和“小”不兼容的情況。

臨床療效骨髓和血液惡性腫瘤臍帶血移植的造血幹細胞的比較分析的結果表明，兒童同種異體移植GSK臍帶血顯著減少的反應“移植物抗宿主”的風險，但有嗜中性粒細胞和血小板的恢復的時間比較長移植後100天死亡率更高。

對早期致死性原因的研究使得澄清GSK異基因移植的禁忌成為可能，其中最重要的是：

• 在接受者或獻血者中存在鉅細胞病毒感染的陽性測試（不進行預防性治療）;
• 急性放射病;
• 是否存在或甚至懷疑患者中存在黴菌感染（沒有系統的早期預防性使用殺真菌藥物）;
• 成纖維細胞增生症患者接受長時間治療（因為心臟驟停和多器官功能衰竭的概率很高）;
• 從HLA-不相同的供體移植（沒有預防環孢菌素A的急性“移植對抗宿主”反應）;
• 慢性病毒性丙型肝炎（由於發生肝靜脈閉塞性疾病的高風險）。

因此，GSK移植可能導致嚴重的並發症，這往往導致死亡。在早期（最多至100天移植後）期間這些包括感染並發症，急性反應“移植物抗宿主”，移植排斥（neprizhivlenie HSC供體），venookklyuzionnaya肝臟疾病，以及由於預處理方案毒性，組織損傷，的量，高特性重塑的速度（皮膚，血管內皮，腸上皮）。後期移植後期間的並發症包括潛在疾病的“移植物抗宿主”復發，兒童生長遲緩，受損的生殖功能和甲狀腺眼病的慢性反應。

最近，隨著關於骨髓細胞可塑性的出版物的出現，出現了使用GSK治療心髒病和其他疾病的想法。雖然對動物的一些實驗也支持這種可能性，但關於骨髓細胞可塑性的結論還需要證實。這種情況應該被那些認為人類骨髓移植細胞容易轉化為骨骼肌，心肌或中樞神經系統細胞的研究人員所考慮。GSKs是這些器官再生的天然細胞來源的假設需要嚴肅的證據。

特別是，發表了一封公開隨機試驗Belenkova五（2003年），其目的的第一批成果 - 研究C-SIS的效果（即動員自體血造血幹細胞）臨床，血液動力學和患者的神經體液狀況中度至重度慢性心臟衰竭，以及與標準治療（ACE抑製劑，β-阻斷劑，利尿劑，強心苷）及其安全性評估。該研究項目的作者的結果首次公佈注意到，有利於O型CBP的唯一參數是一個病人的治療誰用此藥治療過程中發現，在所有的臨床和血流動力學參數不爭的改進的結果。然而，造血幹細胞動員到血液中，然後在心肌梗死後區心肌再生的理論尚未得到證實 - 甚至在患者與多巴酚丁胺超聲心動圖的一個積極的臨床力度並未透露存活心肌的領域的疤痕區的出現。

應該指出的是，到目前為止，允許推薦替代性細胞治療用於廣泛引入日常臨床實踐的數據顯然是不夠的。臨床研究的精心設計的和定性的效果，以確定的再生細胞治療，適應症和禁忌症給它的發展的各種選項，以及對組合使用的再生和塑料療法和常規手術或保守治療的指導方針的有效性。到目前為止，以什麼樣的骨髓細胞（造血幹細胞或間質）的人口問題沒有反應可引起神經元和心肌細胞，而且目前尚不清楚這種在體內貢獻什麼樣的條件。

這些領域的工作在許多國家進行。在對急性肝功能衰竭治療的有前途的方法中健康的美國國立衛生研究院，與肝移植沿著座談會的總結，移植標有肝細胞氙或同種異體肝細胞和體外生物反應器的連接。有直接的證據表明，只有外來的，功能活躍的肝細胞可以為受體的肝臟提供有效的支持。對於臨床使用分離的肝細胞，有必要創建一個細胞庫，這將顯著減少細胞釋放和使用之間的時間。建立一個孤立的肝細胞庫最可接受的是液氮中的肝細胞冷凍保存。在急性和慢性肝功能不全患者的臨床中使用這些細胞時，顯示出相當高的治療效果。

儘管肝細胞實驗和臨床移植的樂觀和振奮的成績，仍然有許多問題仍然遠未解決。這些包括合適的機構的限制量，以獲得分離的肝細胞的分離不充分有效的方法，由於缺乏保存肝細胞移植的細胞的生長和增殖的調節機制的模糊理解的標準化的方法，缺乏足夠的方法植入評價或排斥同種異體肝細胞的。這也應包括使用同種異體或異種細胞移植免疫的存在，雖然小於在肝移植，但需要免疫抑製劑的應用，包封分離肝細胞或特殊處理的酶。肝移植往往導致在排斥反應，這就需要使用細胞抑製劑的受體和供體之間的免疫衝突。一個解決這個問題，使用聚合物微孔介質分離肝細胞，這將提高他們的生存，因為囊膜有效地保護肝細胞，儘管主機免疫。

然而，在急性肝功能衰竭等肝細胞移植有因肝細胞植入在新的環境中獲得了最佳步運作所需的相當長一段時間沒有效果。一個潛在的局限性是分離的肝細胞的膽汁異位移植的分泌，和生物反應器使用時必需生理屏障作用的人蛋白質和產生異種蛋白的肝細胞之間差異的物種。

在文獻中有報導說，骨髓基質幹細胞的局部移植促進骨缺損的有效校正，並且骨修復在這種情況下比自發修復再生更加密集。在動物模型中的幾個臨床前研究令人信服地證明使用矯形骨髓基質幹細胞移植的，雖然優化這些方法，即使在最簡單的情況下，需要進一步開展工作的可能性。具體而言，體外擴增成骨基質細胞的最佳條件還沒有被發現，其理想載體（基質）的結構和組成仍然沒有工作。未確定大塊骨再生所需的最小細胞數量。

已證明間充質乾細胞表現出經皮可塑性 - 分化為與原始細胞的細胞表型無關的細胞類型的能力。在最佳條件下在體外維持超過50分裂的骨髓基質細胞，這使得它能夠從1毫升骨髓抽出的接收基質細胞的數十億多克隆幹細胞系培養物。然而，人口特徵在於異質性間充質幹細胞，這本身表現為在菌落的大小，細胞類型的形成和形態多樣性的不同的速度變化 - 從成纖維細胞樣梭形到大扁平細胞。3週觀察到表型異質培養基質幹細胞的內：一個集落形成骨組織的結節，而另 - 脂肪細胞的簇，以及其他，較為少見，軟骨形成的島嶼。

為了治療中樞神經系統的退行性疾病，首先使用胚胎神經組織的移植。近年來，代替胚胎腦的組織，源自神經乾細胞的神經球細胞已被移植（Poltavtseva，2001）。神經球含有定向神經前體和神經膠質細胞 - 這為移植後恢復失去的大腦功能提供了希望。細胞移植到神經球後分散的大鼠紋狀體腦體標記其增殖和分化成多巴胺能神經元，這消除了在大鼠實驗gemiparkinsonizmom馬達不對稱。然而，在某些情況下，腫瘤細胞從神經球細胞發育而來，導致動物死亡（Bjorklund，2002）。

兩組患者中，無論是患者還是醫生就知道看他們（雙盲）的臨床仔細研究，即一組患者移植的胚胎組織與產生多巴胺的神經細胞，患者的第二組做了一個錯誤的一步，得到意想不到的效果。移植胚胎神經組織的患者感覺並不比對照組患者更好。此外，5出的33例患者經過2年的胚胎神經組織移植後發生持久的運動障礙，它無法控制的患者組（幹細胞：科學進展和未來的研究方向納特研究所，衛生美國......）。一個大腦的神經幹細胞的臨床研究尚未解決的問題是真實的前景和它們的衍生物移植中樞神經系統疾病的矯正局限性的分析。這可能是長時間的癲癇發作引起的neyronogenez在海馬，導致其結構和功能的改變可能是癲癇的逐步發展的一個因素。這個結論是特別值得注意，因為它指向一代的成人大腦新生神經元，並異常突觸連接的形成可能產生的負面影響。

我們不應忘記，在用細胞因子（有絲分裂原）的培養介質近似於幹細胞的特性，以腫瘤細胞，因為它們發生在接近在細胞週期的調節變化，確定無限分裂的能力。將胚胎幹細胞的早期衍生物移植到人類是愚蠢的，因為在這種情況下，惡性腫瘤的發展的威脅非常大。使用他們更有承諾的後代，即分化系的祖細胞更安全。然而，目前還沒有製定出一種可靠的技術來獲得穩定的人類細胞系的正確方向。

利用分子生物學技術在幹細胞修飾的幫助下糾正遺傳性病變和人類疾病對於實用醫學而言是非常有意義的。幹細胞基因組的特點使得開發獨特的移植方案的目的是糾正遺傳疾病。但是在這個方向上，在幹細胞的基因工程的實際應用開始之前，還有一些需要克服的局限性。首先，有必要優化離體幹細胞基因組修飾過程。已知幹細胞的延長（3-4週）增殖減少了它們的轉染，因此需要幾輪轉染來實現其高水平的基因修飾。然而，主要問題與治療基因的表達持續時間有關。到目前為止，在所有研究中，修飾細胞移植後有效表達的時間不超過四個月。隨著時間的推移，100％的病例中，轉染基因的表達由於啟動子的失活和/或用修飾基因組的細胞死亡而降低。

一個重要的問題是使用細胞技術在醫學上的成本。例如，估計每年為骨髓移植部門提供醫療費用的年度資金需求為每年執行50次移植，費用約為900,000美元。

細胞技術在臨床醫學中的發展是一個複雜且多階段的過程，涉及多學科科學和臨床中心與國際社會的建設性合作。同時，特別關注細胞療法領域的科學研究組織。其中最重要的是製定臨床試驗方案，監測臨床數據的有效性，形成國家研究登記表，將其納入國際多中心臨床試驗方案，並將結果引入臨床實踐。

結論引入到細胞移植的問題，我想表達的是希望從科學的不同領域烏克蘭的頂尖專家的共同努力，確保顯著進步實驗和臨床研究，並允許在未來幾年內找到有效的方法來幫助身患重病的人需要器官移植，組織和細胞。

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