及時鑑別感染因子對於正確選擇抗菌藥物是非常重要的,以防止在經驗性施用抗生素期間發生細菌耐藥性。革蘭氏染色是將患者(痰液,支氣管肺泡沖洗液等)獲得的所有類型材料著色以用於快速和指示性建立感染因子的最常見方法。
使用痰塗片塗片顯微鏡檢查對可能的病原體進行初步評估。革蘭氏染色的塗片痰在將其播種到營養培養基中之前進行檢查,目的是評估適合培養和鑑定可能的病原體。痰液被認為是合適的,如果塗片染色的革蘭氏染色,在顯微鏡下增加少量顯示超過25個白細胞和少於10個上皮細胞在視野。可用於培養的優質痰樣本的跡像是白細胞在上皮細胞中的發病率以及位於白細胞內部或周圍的一種細菌的存在。製劑中的革蘭氏陽性菌呈深藍色,革蘭氏陰性菌呈粉紅色。非典型肺炎(支原體,軍團菌,立克次氏體和衣原體)的病原體未被革蘭氏染色,因此使用血清學方法進行檢測。
Tsiol-Nielsen的斑點塗片用於鑑定抗酸桿菌,主要是結核分枝桿菌。該製劑由膿痰顆粒製備,其選自4-6個不同的地方。將所選擇的顆粒在2個載玻片之間小心研磨成均質物質,在空氣中乾燥,固定在燃燒器的火焰上。結核分枝桿菌呈紅色,所有其他痰和細菌呈藍色。結核分枝桿菌具有不同長度的細長,稍彎曲的枝條,在末端或中間具有增厚,分組並單獨排列。結核分枝桿菌的檢測是肺結核病損最可靠的標誌。根據Tsiol-Nielsen對帶有活動形式肺結核的塗片進行染色的方法具有50%的靈敏度和80-85%的特異性。