皰疹的診斷是基於經典的病毒脫落的敏感細胞培養,免疫熒光法和血清學方法進行,利用現代分子生物學方法(PCR,斑點雜交),它允許你診斷所有的皰疹病毒組,包括HHV-6和HHV-7進行陰道鏡研究類型。
實驗室診斷皰疹病毒感染的方法
旨在分泌HSV或檢測病毒顆粒和/或其組分的主要方法 |
旨在檢測人體生物體液中HSV抗體的輔助方法 |
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結果顯示,76%的患者有HSV-2引起的生殖器皰疹(GH),以及24%的HSV-1型引起生殖器皰疹(GH)。作為單一感染的GG僅在22%的患者中發生,在78%的患者中檢測到微生物協會。在46%的患者中,檢測到由兩種病原體引起的寄生蟲病,包括40%的病例中檢測到衣原體。塗片中不太常見的確定為糞便,滴蟲,淋球菌。
在27%的患者中,寄生蟲病以三種表示,四種病原體以5.2%表示。更常見的是披衣菌與加德納菌和假絲酵母真菌的組合。這些數據證明,需要患者YY的徹底細菌學檢查,以確定致病因子的組合,以及深入的泌尿生殖道的混合感染,這將允許HSV感染的差異化綜合治療的發病機制的研究。
根據皰疹性病變的位置,分離HSV時要研究的材料
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細胞刮擦 |
SMZ |
從支氣管中吸出 |
活檢標本 |
血 | |||
1 |
2 |
3 |
4 | ||||||
皮革 |
+ |
+ | |||||||
眼睛 |
+ |
+ | |||||||
生殖器 |
+ |
+ | |||||||
肛門 |
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+ |
+ | ||||||
口 |
+ |
+ |
+ | ||||||
CNS |
+ |
+ |
+ |
+ | |||||
肺 |
+ |
+ |
+ | ||||||
肝臟 |
+ |
+ | |||||||
先天性 |
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+ |
+ |
+ |
+ |
鉅細胞病毒感染的實驗室診斷方法
方法 |
獲得結果所需的時間 |
筆記 |
病毒學 | ||
電子顯微鏡 |
3小時 |
Malodostupen |
病毒在細胞培養中的分離(CPD) |
4-20天 |
標準, |
用單克隆抗體對早期AH進行免疫熒光染色 |
6個小時 |
不太 |
TSITOLOGICHESKIY |
2-3小時 |
不太 |
SEROLOGICHESKIY | ||
RSK |
2天 |
標準 |
Ssubsistence |
1天 |
費時 |
RIF |
6個小時 |
簡單, |
NRIF |
6個小時 |
複雜 |
RIMF |
6個小時 |
複雜 |
IFA(IgM,TO) |
6個小時 |
快速,簡單 |
免疫印跡 |
6個小時 |
昂貴 |
分子生物學 | ||
MG |
5-7天 |
昂貴, |
PCR |
3小時 |
昂貴 |
診斷帶狀皰疹病毒的方法
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實驗室 |
間接 | |
分配 |
織物培養,雞胚,實驗室動物,與允許細胞或輔助病毒共培養 |
鑑定分離物 |
中和反應,DSC,IF,IPPE,沉澱分離物的反應,凝集,IF |
直 | |
細胞學 |
塗片:彩色免疫熒光 |
組織學 |
細胞的病理形態 |
結構 |
胚胎顯微鏡,免疫電子顯微鏡 |
抗原的測定 |
IF,PIÉF,RIM,IFA |
確定抗體的局部產生 |
Ig M,Ig G,Ig A:IFA,RIA |
分子生物學方法 |
分子雜交,PCR |
由帶狀皰疹病毒引起的感染的實驗室診斷
診斷 |
方法 |
預期結果 |
急性原發感染 |
1 |
2小時後檢測 |
2 |
抗體水平增長緩慢 | |
3 |
感染後3天 | |
急性 |
1 |
2小時內檢測ULV |
2 |
抗體水平增長緩慢 | |
4 |
在出現皮疹後4天 |
- WIEF囊泡的液體測定;
- 血清學:DSC,ELISA,旨在鑑定
- 血清學:ELISA,旨在檢測IgM;
- 血清學:ELISA,旨在檢測IgA,IgM。
指示由帶狀皰疹病毒引起的感染的免疫應答的方法
途徑 |
方法 |
檢測第二份血清中增加的抗體滴度 |
RSK,RTGA,RPGA,中和反應IF,RIM,ELISA |
檢測第一份血清樣品中的Ig G,Ig A類特異性抗體 |
IFA,IF,RIM,膠乳凝集 |
病人血清皰疹病毒感染血清學檢查結果解釋(ELISA)
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感染的平均閾值 | |
分析結果 |
解釋 | |
Cytomegaly抗CMV IgG(1-20 E / ml) 抗CMV IgM(100-300%) |
陽性1-6陽性6-10陽性> 10 |
緩解 |
單純皰疹1,2种血清型 |
正100-400正400-800正> 800 |
緩解 |
該表列出了皰疹病毒感染的實驗室診斷的主要方法,並且還建議檢查HSV分離的生物材料,考慮到皰疹病灶的局部化
可靠的是通過感染敏感的細胞培養物來分配單純皰疹和CMV。因此,在26例復發期的病毒學檢查中,在敏感的Vero細胞培養物中分離出23例(88.4%)HSV。在感染的培養物中,觀察到HSV特徵性的細胞病變作用模式 - 多核鉅細胞的形成或叢狀形式的圓形和擴大細胞的積聚。在52.1%的病例中,有可能在感染後16-24小時檢測到病毒致細胞病變效應的病灶。受感染培養物培養48-72小時後,導致特定細胞破壞的物質百分比增加至87%。只有13%的病例在感染後96小時或更多或重複傳代檢測到陽性結果。
廣義皰疹感染的實驗室診斷方法
旨在檢測(分離)皰疹病毒,其顆粒及其組分的主要方法 |
旨在檢測生物液體中皰疹病毒抗體的輔助方法,檢測血清中的酶促轉變 |
易感細胞培養物和動物皰疹病毒的分離 |
中和 |
為了診斷傳染性單核細胞增多症(由VEB引起的感染),使用血清學方法。Paul Bunnel對紅細胞的反應,血清的單一研究診斷效價為1:28或更高,或在配對血清檢查中抗體增加4倍。使用Goff-Bauer反應,使用馬的4%形式化紅細胞懸液。2分鐘後將結果考慮在內,傳染性單核細胞增多症的反應非常特異。
目前正在開發一種酶免疫分析法(ELISA)來診斷傳染性單核細胞增多症。在這種情況下,患者血清中的IgG和IgM抗體通過將其與感染EBV的成淋巴細胞孵育,然後用熒光抗體處理來確定。在疾病的急性期,病毒衣殼抗原的抗體以1:160及以上的滴度測定。
當使用數在IFA進口商業測試系統可以識別:抗體螞蟻伊根EBV信封抗體EBV,整體抗體EBV的早期抗原,在疾病的急性期和在細胞核和細胞質中的確定的早期抗原,和有限的抗體EBV早期,在疾病的急性期,並在核和細胞的細胞質中確定的,有界的抗體EBV早期抗原,在疾病僅在細胞的細胞質中的中間確定,並且抗體對EBV核抗原。使用這些試驗系統允許許多與EBV相關疾病的鑑別診斷。
陽性ELISA之後,以確定抗體的EBV給予免疫印跡確認響應,檢測抗體以分離EBV標記蛋白(對 - 蛋白質)的存在:P23,P54,P72(蛋白質的存在表明再現EBV的可能性),第138說以上實驗室方法用於控制治療的有效性。
病毒學方法的靈敏度為85-100%,特異性為100%,研究時間為2-5天。通常在實踐中,使用直接免疫熒光(PIF)與針對HSV-1和HSV-2的多克隆或單克隆抗體的方法。UIF方法可以在傳統的臨床實驗室中輕鬆複製,不昂貴,靈敏度高於80%,特異性為90-95%。通過免疫熒光顯微鏡顯示胞漿包涵體,形態特徵的存在,在塗片感染細胞的百分比,擦傷尿道,宮頸管,宮頸,直腸。
UIF方法提供了細胞的形態學特性和HSV抗原定位的變化。根據UIF數據,除了皰疹病毒的細胞損傷的直接徵兆(檢測特異性發光)外,還有間接的皰疹感染跡象:
- 核物質的聚集,核分裂的剝離;
- 所謂的存在。細胞核中只剩下一個核膜;
- 核內包涵體的存在 - 科德里的小腿。
當設置UIF醫生不僅接收質量,而且我們已經被用於評估抗病毒治療的阿昔洛韋(AC)的有效性感染細胞的定量評估。因此,80名單純性生殖器皰疹(GG)患者通過UIF方法動態檢查。它被示出的是,如果用在塗片阿昔洛韋治療之前88%的患者有感染細胞(50-75%及以上)的高比例,在塗片阿昔洛韋之一當然在箱子31%檢測到的患者健康的細胞的44%之後被標記單個感染的細胞和25%的患者有10%的感染細胞。
用阿昔洛韋治療生殖器皰疹患者塗片中感染細胞的含量(PIF反應)
疾病期間 |
塗片百分比 | |||||
感染的細胞 |
正常 | |||||
超過 |
50-75% |
40-50% |
10% |
N / sp中的單個單元 | ||
復發(治療前) |
25% |
63% |
12% | |||
(20) |
(50) |
(10) | ||||
緩解(治療後) |
25% |
31% |
44% | |||
(20) |
(25) |
(35) |
使用多年的UIF和點雜交方法,幾乎100%的病例與研究結果一致。應當注意的是,為了增加GH的診斷的可靠性,尤其是在情況下,有亞臨床和皰疹malomanifestnyh形式,建議使用實驗室診斷的2-3方法,檢查懷孕婦女,尤其是當與產科病史弱勢,人未指定婦科診斷。
因此,對於泌尿生殖道的病毒和細菌感染的診斷PCR有必要評估與歷史,特定的臨床症狀的存在(或不存在)中獲得的陽性結果。如果用PCR檢測到衣原體,那麼在這種情況下可以談論感染並相應地解決治療問題。在檢測的支原體(ureaplasmas)的情況下是機會病原體,以確定診斷,需要進行培養進一步的研究,噸。E.作物材料從患者敏感細胞培養物。只有在培養分析中獲得陽性結果時,我們才可以談論支原體病診斷的實驗室確認。如果需要,相同的方法將允許確定分離的支原體對常用藥物形式(抗生素,氟喹諾酮等)的敏感性。
也許是與Nepresviridae家族的幾種病毒一起感染。通常我們檢測到一例HSV-1,HSV-2和CMV病毒感染。更常感染幾種皰疹病毒的患者是臨床和實驗室表現為繼發性IDS(血液科,腫瘤,HIV感染患者)的患者。因此,顯示出HIV感染進展的臨床和免疫疾病伴隨著通過分子雜交方法檢測到的皰疹病毒數量的增加。在此預測中,最重要的可被認為是HSV-1,CMV和HHV-6型的DNA的複雜的一步檢測。