精確診斷肺炎球菌感染只能在從病變或血液中排出病原體之後。對於檢查,痰液被用於肺炎,疑似膿毒症的血液,膿性分泌物或其他疾病中的炎性滲出物。病理材料經受顯微鏡檢查。檢測革蘭氏陽性球菌屬披針形,被膠囊包圍,是初步診斷肺炎球菌感染的基礎。為了確定分離的雙球菌屬於肺炎球菌的屬性,使用包含高滴度抗體的組合型特異性血清對所有血清型的肺炎球菌。在肺炎球菌性腦膜炎的第一天,致病因子可以在腦脊液中發現,它位於細胞外和細胞外。
為了分離純培養物,將測試物質播種到血液,血清或腹水瓊脂中。在營養培養基上,肺炎球菌產生小而透明的菌落。生物樣品可以用來分離純培養物。為此,用測試材料腹膜內感染白色小鼠。如果致病性肺炎球菌存在於小鼠材料中,則它們在24-48小時後死亡。為了檢測肺炎球菌抗原,可以使用固相免疫電泳和PCR的方法。