PCR作為診斷遺傳疾病的方法
最近審查：23.04.2024
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PCR是分子遺傳學方面的一項新成果，用於DNA擴增，並允許DNA的特定部分（即任何感興趣的基因）在體外迅速復制超過200,000次。為了進行反應，具有一個細胞的DNA材料就足夠了; 通過PCR擴增的DNA的量非常大，以至於該DNA可以簡單地染色（不需要電泳後使用放射性探針）。進行PCR的先決條件是了解擴增的DNA區域的核苷酸序列以適當選擇人工合成的引物。
目前，PCR是發生在一個單一的管，並且為了獲得足夠大的號碼，可以通過電泳來鑑定拷貝由特定DNA序列的擴增的重複循環（再生，複製）的處理。反應的關鍵組分之一是“引物” - 合成的寡核苷酸，由20-30個鹼基組成，與模板DNA的識別位點上退火（附著）的“位點”（部分）互補。
PCR在可編程恆溫器 - 熱循環儀（熱循環儀）中自動進行。根據熱循環儀的預設程序重複三次循環，從而獲得模板DNA的可識別部分的確切拷貝，重複30-50次。在第一輪循環中，寡聚體與原始模板DNA雜交，然後（在隨後的循環中）和新合成的DNA分子在反應混合物中積累時進行雜交。在後一種情況下，DNA合成不會由於溫度範圍的變化而終止，而是在到達擴增區域的DNA聚合酶邊界時，其將新合成的DNA區域的大小確定為一個核苷酸內。
作為檢測獲得的DNA分子的方法，使用電泳，根據擴增子（擴增產物）的大小將擴增材料分開。
在PCR的幫助下，可以直接研究推定的突變或多態性位點的定位位點，並研究DNA的任何其他特定特徵的存在。
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